Zpět na úvodní stranu Sylabus cvičení k přemětu rostlinné explantáty
  • Předmět je vypisován v jarním semestru
  • Mateřské obory: obecná biologie, molekulární biologie a genetika, buněčná a molekulární diagnostika)
    		• Sylabus - textový dokument (MWord) pro tisk

    1.   Úvod do praktika: podmínky axenické kultury a požadavky na vybavení laboratoře, typy kultur, kultivační nádoby a různé způsoby kultivace, organizace, protokoly, literatura.

    2.    Příprava živného média:  různé varianty agarem ztuženého média (MURASHIGE – SKOOG 1962, GAMBORG a kol. 1968, atd.), namíchání a rozlití do kultivačních nádob.

    3.   Nácvik práce ve sterilních podmínkách: sterilizace nástrojů, vody, nádob, živných médií, pracovního prostoru, povrchová desinfekce semen, sterilní výsev semen (Nicotiana, Daucus, Cucumis), pasážování (přesazování do nového média) sterilních kultur (Drosera, Saintpaulia).

    4.  Mikropropagace: Odvození primární kultury bylin, různé zdroje explantátů - list, stonek, rhizom (Saintpaulia, Begonia, Nephrolepis).

    5.   Kalusové kultury: iniciace kalogeneze, založení primární kultury kambiálních segmentů kořene (Daucus).Vliv různého poměru auxinových a cytokininových růstových regulátorů na organogenezi na stonkových internodálních segmentech (Nicotiana).

    6.   Oplození in vitro: izolace placent s vajíčky a jejich opylení in vitro, kvalita pylu a její hodnocení (Narcissus, Puschkinia).

    7.   Transformace segmentů listů tabáku diskovou metodou pomocí vektoru Agrobacterium tumefaciens, LK médium pro kultivaci bakterií.

    8.   Izolace zygotických embryí: založení kultury – desinfekce semen, izolace embryí a jejich inokulace do živného média (Picea, Zea, Capsella).

    9.   Indukce haploidních rostlin: Založení prašníkové kultury, srovnání regenerační kapacity různých linií tabáku (Nicotiana).

    10.   Kultury nižších rostlin: kultivace hub – udržovací kultury a příprava očkovacího inokula, příklad suspenzní kultury (Pleurotus, Lentinus).

    11.   Meristémové kultury : Izolace apikálních a axilárních meristémů bylin a dřevin (Dianthus, Clematis), tuberizace (Solanum).

    12.   Somatická embryogeneze: indukce: přímá – apikální meristémy hrachu (Pisum), nepřímá – kalus mrkve (Daucus).

    13.   Kryoprezervace: izolace axilárních meristémů, enkapsulace do alginátu a jejich dehydratace a následné rychlé zmrazování v N2.

    14.    Kontrola protokolů a zápočet

    		  
    Zpět na úvodní stranu